Informații de screening pentru abuzul de substanțe(PVD) și diagnosticul acestuia sunt rezumate în tabelul de mai jos.

- Teste de urină pentru a diagnostica intoxicația cu substanțe (SPO). Testarea substanțelor urinare (UDT) include două tipuri de proceduri: screening (inițial) și definitiv (confirmator).

Pentru screening se folosesc de obicei metode rapide și ieftine. Testele finale sunt concepute pentru a elimina cel puțin parțial rezultatele fals pozitive.

- Verificare la locul de muncă. Standarde obligatorii Programe federale testarea drogurilor la locul de muncă necesită utilizarea metodelor imunoanalitice pentru screening și cromatografia în gaz sau spectrometria de masă pentru a confirma rezultatele.

- Teste de screening. Indicatii. Motivele bune pentru screeningul substanțelor (PSS) includ o deteriorare marcată sau o anomalie a comportamentului, dispoziției, judecății și gândirii (halucinații, paranoia, schizofrenie) la o persoană tânără; deteriorarea performanțelor școlare sau absenteismul de la școală/serviciu; comportament antisocial, cum ar fi minciuna cronică, furtul și lipsa de respect pentru drepturile celorlalți; violențe repetate împotriva oamenilor sau atacuri asupra proprietății altor persoane; tulburări de dispozitie majore depresive sau bipolare; tentative de sinucidere; oboseală inexplicabilă la o persoană; rinită vasomotorie cronică; convulsii sau comă de etiologie necunoscută; finalizarea recentă a tratamentului pentru dependența de marijuana, cocaină sau opiacee.

Prelevarea de probe. Monitorizare continuă. Calea unei probe de urină pentru testarea substanțelor psihoactive (SAT) trebuie să fie documentată din momentul colectării, pe tot parcursul transportului într-un container etichetat și sigilat și în momentul analizei. Dacă proba este prelevată fără observație, pH-ul, temperatura și densitatea trebuie înregistrate imediat. Urina proaspătă trebuie să aibă o temperatură de 33-36 °C și un pH de 4,6 până la 8,0.

Depozitare. Proba de urină poate fi păstrată la temperatura camerei timp de până la 3 zile sau în frigider până la 1 săptămână, iar pentru păstrare pe termen lung (de la săptămâni la luni) este cel mai bine congelată la -6,6 °C sau mai puțin. Dacă intenționați să testați pentru LSD, urina trebuie păstrată într-un loc întunecat.

Observație după analiză. Dacă eșantionul se dovedește a fi pozitiv, concluziile finale trebuie trase pe baza rezultatelor unor teste suplimentare periodice sau neregulate.

Nivelul pragului. Nivelul pragului este stabilit de producătorul echipamentului analitic și indică la ce concentrație a substanței detectate există o probabilitate statistică mare ca rezultatul să nu fie un fals pozitiv. Rezultatele sub nivelul limită standard sunt considerate negative, chiar dacă o metodă mai sensibilă sau un nivel limită diferit le-ar clasifica drept pozitive.

Nivelul pragului set ținând cont de sensibilitatea metodei analitice particulare, reacțiile încrucișate, experiența acumulată și tehnica aleasă pentru confirmarea rezultatelor (de obicei cromatografie gazoasă-spectrometrie de masă).


- Teste finale. Metoda standard pentru analiza toxicologică definitivă este cromatografia gazoasă-spectrometria de masă (GC/MS). Este capabil să detecteze majoritatea PVZ și metaboliții lor cu o sensibilitate de până la câteva nanograme pe mililitru. Un rezultat pozitiv al imunotestului este confirmat de cele mai precise metode GC/MS, inclusiv ionizarea cu bombardament de electroni, monitorizarea tri-ionului și determinarea raporturilor ionilor.

Dacă nu vorbim de un control medico-legal, rezultatele cromatografia în strat subțire(TCX) poate fi confirmat prin cromatografie lichidă de înaltă performanță (HPLC) sau cromatografie lichidă gazoasă (GLC). GLC este util pentru detectarea alcoolului și inhalanților volatili în urină și sânge. În HPLC, un detector de ultraviolete, fluorescență sau electrochimic instalat la ieșirea coloanei permite măsurarea concentrațiilor de substanțe psihoactive (PCL) cu o sensibilitate și o specificitate mai mari decât TLC. GLC folosește, de asemenea, diferite tipuri de detectoare, cum ar fi azot-fosfor.

Substanțe cu reacție încrucișată. Substanțele comune care reacționează încrucișat la screening-ul imunologic sunt enumerate în tabelul de mai jos.


- E timpul să obții rezultate. Timpii de detectare a substanțelor psihoactive (DTS) în urină folosind nivelurile lor de prag sunt prezentate în tabelul de mai jos. Limitele de detecție pentru substanțele psihoactive comune (CPD) sunt date în tabelul de mai jos. Problemele întâlnite la analiza probelor de urină de la lucrătorii industriali și sursele de eroare în astfel de teste sunt rezumate mai jos. Metodele de falsificare a probelor trimise spre analiză sunt discutate în următorul articol separat de pe site.

Probele de urină trimise pentru analiza substanțelor psihoactive (PSA) trebuie testate. Dacă nivelul este sub 4,0 mmol/L, rezultatele negative pentru substanțele psihoactive (NPS) pot fi invalide.


1. Stabiliți dacă este nevoie de screening. Este justificat de preocupări de sănătate publică sau preocupări industriale legate de abuzul de substanțe?

2. Determinați scopul screening-ului. În cazul în care analiza detectează numai medicamente interzise oficial sau va face parte din mai multe program general pentru a combate abuzul de substanțe, inclusiv alcool, medicamente eliberate fără prescripție medicală sau medicamente pe bază de rețetă?

3. Determinați tipul de analiză necesar. Ce substanțe ar trebui să detecteze?

4. Determinați frecvența de screening. Ar trebui efectuată la angajare, periodic sau în legătură cu accidente și accidente de muncă? În prezent, problema necesității de screening a urinei în timpul angajării pare să fie aproape rezolvată; cu toate acestea, rămân provocări semnificative în ceea ce privește screening-ul periodic randomizat.

5. Selectați un laborator adecvat care poate furniza servicii neîntrerupte și efectua teste finale (de confirmare) dacă rezultatele inițiale ale screening-ului sunt pozitive.

6. Creați un protocol pentru manipularea rezultatelor pozitive ale testelor înainte de implementarea unui program de screening. (Nu este înțelept să așteptați rezultatele unui screening înainte de angajare înainte de a discuta despre cum să procedați cu un candidat pentru un loc de muncă.)

7. Determinați costul programului, ținând cont de eventualele costuri ale testelor finale.

8. Fiți conștienți de substanțele care ar putea să nu fie examinate și care pot afecta performanța, cum ar fi alcoolul și medicamentele eliberate pe bază de rețetă sau fără prescripție medicală.

9. Fiți conștienți de limitările screening-ului. Sunt posibile rezultate fals pozitive. În mod ideal, screening-ul ar trebui combinat cu un program mai larg de combatere a abuzului de substanțe, inclusiv educația angajaților și a conducerii.

10. Fii realist. Screening-ul nu rezolvă problemele legate de abuzul de substanțe.

Surse de eroare la testarea urinei pentru substanțe care creează dependență:

Înlocuirea probelor de urină cu persoana testată (cu urina unei persoane care nu consumă substanțe sau suc de mere)

Alterarea unei probe prin diluare cu apă, clorură de sodiu, oțet, amoniac, clorhidrat de sodiu sau soluție de săpun

Interferențe datorate consumului de droguri fără prescripție medicală sau consumului de alimente, în special la testarea pentru amfetamine (simpatomimetice) și opiacee

Erori asociate cu colectarea sau depozitarea probei (vase murdare, urină tulbure nefiltrată, păstrare la temperatura camerei timp de 4 zile sau mai mult, acțiune lumină strălucitoare(distruge LSD)

pliante

Surfactanți sintetici (surfactanți)

Companie STYLAB oferă sisteme de testare pentru determinarea agenților tensioactivi sintetici folosind testul imunosorbent legat de enzime (ELISA). Trusele conțin toți reactivii necesari, inclusiv soluțiile standard.

Alchilfenol (AP) (alchilfenoli), ELISA.

Caietul de sarcini: Kit cu plăci de alchilfenol (AP), L53000401-096
Format:
Standarde: 0 / 5 / 20 / 100 / 500 µg/l
Pregătirea probei: Apă:
Costuri de timp: Analiză: 2,5 ore
Limita de detectare: 5 ug/l

Alchil etoxilat (AE) (alchil etoxilat), ELISA.

Caietul de sarcini: Kit plăci de etoxilat de alchil (AE), L52000401-096
Format: Placă de bandă, 96 godeuri (12 benzi din 8 godeuri)
Standarde: 0 / 0,02 / 0,05 / 0,1 / 0,4 mg/l
Pregătirea probei: Apă: filtrare, purificare prin extracție în fază solidă
Costuri de timp: Analiză: 2,5 ore
Limita de detectare: 0,02 mg/l

Alchilfenol etoxilat (APE) (alchilfenol etoxilat), ELISA.

Caietul de sarcini: Alchilfenol etoxilat (APE), L51000401-096 sau L51000401-020
Format: Tabletă cu dungi, 96 de unități. sau eprubete, 20 spec.
Standarde: 0 / 0,02 / 0,05 / 0,1 / 0,4 / 1,0 mg/l
Pregătirea probei: Apă: filtrare, purificare prin extracție în fază solidă
Costuri de timp: Analiză: 2,5 ore
Limita de detectare: 0,02 mg/l

Alchilbenzen sulfonat liniar (LAS) (alchilbenzen sulfonați liniari), ELISA.

Surfactanți sintetici

Surfactanții (surfactanții), inclusiv cei sintetici (surfactanții), sunt folosiți pe scară largă în diverse domenii. Acestea sunt principalele componente active ale detergenților de uz casnic, șampoanelor și săpunurilor. Agenții tensioactivi se găsesc în produse cosmetice, lacuri, vopsele și produse de combatere a dăunătorilor. De asemenea, sunt utilizate în producția de textile, metalurgie, producția de petrol, construcții, industria alimentară și în medicină. Volumul producției de agenți tensioactivi este în continuă creștere.

Astfel de posibilități diverse de utilizare a agenților tensioactivi sunt determinate de proprietățile acestora. Aceste substanțe reduc tensiunea superficială la interfață, ceea ce le permite să formeze filme, emulsii și spumă.

Aceste abilități ale agenților tensioactivi sunt determinate de structura moleculelor lor. Moleculele majorității acestor substanțe constau din două părți - un „cap” hidrofil (solubil în apă) și o „coadă” hidrofobă (insolubilă în apă). Când o substanță cu o structură similară intră în apă, se autoorganizează astfel încât „capetele” moleculelor să fie în apă, iar „cozile” să fie în afara acesteia. Pe suprafața apei se formează pelicule la concentrații mari de substanță, se obține o emulsie - o suspensie de micelii („picături”) de substanță într-un solvent.

Filmele sunt separate mediu acvatic din aer, prevenind astfel schimbul de gaze între ele și reducând evaporarea apei. Acest lucru duce la moartea multor organisme acvatice din cauza lipsei de oxigen sau a excesului de dioxid de carbon.

Dacă surfactanții ajung în apă la cantitati mari, capacitatea lor de a dizolva grăsimile poate reprezenta, de asemenea, un pericol pentru organismele vii. Agenții tensioactivi îndepărtează uleiurile de pe pielea mamiferelor și pene de păsări, ceea ce crește umezirea acestora cu apă. Acest lucru duce la moartea animalelor din cauza hipotermiei. Ei dăunează agenților tensioactivi și peștilor prin distrugerea mucusului care le acoperă corpul.

Produșii de descompunere ai unor agenți tensioactivi stimulează creșterea plantelor acvatice. Când nutrienti, formată în timpul descompunerii agenților tensioactivi, se termină, plantele mor, produsele degradării lor intră în rezervor și conținutul de oxigen din apă scade. Alți agenți tensioactivi (ionici) distrug membranele celulare ale plantelor, ceea ce duce la deteriorarea și moartea plantelor.

Miceliile de surfactant pot acționa ca concentratori și purtători ai acestora substanțe periculoase, care sunt slab solubile în apă, dar bine în solvenți organici. Astfel, agenții tensioactivi facilitează pătrunderea substanțelor toxice în corpurile animalelor, de exemplu, metale grele, pesticide, otrăvuri solubile în grăsimi, sporind efectul acestora.

La contactul cu pielea și membranele mucoase, agenții tensioactivi pot provoca reacții alergice și iritații. Unii surfactanți se pot acumula în organism, ceea ce duce la tulburări metabolice, rinichi, ficat, sistemul imunitar și reproductiv.

Prezența agenților tensioactivi în mediu iar componentele sale sunt nedorite. Concentrațiile maxime admise (MAC) ale diverșilor agenți tensioactivi în apă sunt reglementate de standarde de igienă:
GN 2.1.5.1315-03 cu adăugarea GN 2.1.5.2280-07.

Pentru analiza surfactanților se folosesc tehnici complexe și costisitoare care necesită utilizarea unor echipamente speciale. O alternativă la acestea este metoda ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay).

Literatură

  1. „Chimie și chimiști”, nr. 1, 2011
  2. Ostroumov S. A. Efecte biologice atunci când sunt expuse la surfactanți asupra corpului, Max-press, 2001

Surfactanții (surfactanții) sunt, de regulă, chimicale, care se găsesc în orice produs de curățare, chiar și în săpunul obișnuit. Datorită agenților tensioactivi, produsul de curățare curăță.

De ce sunt necesari surfactanții?

Problema este că murdăria, în special grăsimea, este foarte greu de spălat cu apă. Încercați să vă spălați mâinile uleioase cu apă. Apa se va scurge fără a spăla grăsimea. Moleculele de apă nu se lipesc de moleculele de grăsime și nu le iau cu ele. Prin urmare, sarcina este de a atașa moleculele de grăsime la moleculele de apă. Exact asta fac surfactanții. O moleculă de surfactant este o sferă, dintre care un pol este lipofil (se conectează cu grăsimi), iar celălalt este hidrofil (se conectează cu moleculele de apă). Adică, un capăt al unei particule de surfactant este atașat de o particulă de grăsime, iar celălalt capăt este atașat de particule de apă.

Cum ne afectează surfactanții sănătatea?

Cea mai mare parte a umidității din corpul uman este, de asemenea, pe bază de grăsimi. Aceste. de exemplu, stratul protector al pielii (lipidele – grăsimile care protejează pielea de diferite bacterii care pătrund în organism) este o peliculă grasă și este distrusă în mod natural de agenți tensioactivi. Și infecția atacă locul cel mai puțin protejat, ceea ce este desigur dăunător sănătății umane. Experții spun că după folosirea unui detergent, stratul protector al pielii ar trebui să aibă timp să se refacă în decurs de 4 ore până la cel puțin 60%. Acestea sunt standardele de igienă stabilite de GOST. Cu toate acestea, nu toți detergenții asigură o astfel de refacere a pielii. Și pielea fără grăsimi și deshidratată îmbătrânește mai repede.

În plus, agenții tensioactivi nebiodegradabili se pot acumula în creier, ficat, inimă, depozite de grăsime (mai ales multe) și continuă să distrugă organismul pentru o lungă perioadă de timp. Și din moment ce aproape nimeni nu se poate lipsi de detergenți, agenții tensioactivi sunt reînnoiți în mod constant în corpul nostru, provocând daune continue organismului. Surfactanții afectează, de asemenea, funcția de reproducere la bărbați, similar cu radiațiile radioactive.

Problema este agravată de faptul că unitățile noastre de tratament fac o treabă proastă în îndepărtarea agenților tensioactivi. Prin urmare, agenții tensioactivi nocivi se întorc la noi prin alimentarea cu apă în aproape aceeași concentrație în care îi turnăm în scurgere. Singurele excepții sunt produsele cu agenți tensioactivi biodegradabili.

Ce tipuri de surfactanți există?

Surfactanți anionici. Principalul avantaj este costul relativ scăzut, eficiența și solubilitatea bună. Dar sunt cei mai agresivi față de corpul uman.
- Surfactanți cationici. Au proprietăți bactericide.
- Surfactanți neionici. Principalul avantaj este efectul său benefic asupra țesăturii și, cel mai important, biodegradabilitatea 100%.
- Surfactanți amfolitici. În funcție de mediu (aciditate/alcalinitate), aceștia acționează fie ca agenți tensioactivi cationici, fie anionici.

Cum afectează agenții tensioactivi mediul?

Una dintre principalele efecte negative Surfactanții din mediu – scad tensiune superficială. De exemplu, în ocean, o modificare a tensiunii superficiale duce la o scădere a ratei de retenție a CO2 și a oxigenului în masa de apă. Și acest lucru afectează negativ flora și fauna acvatică.

În plus, aproape toți agenții tensioactivi utilizați în industrie și gospodărie, căzând pe particule de pământ, nisip, argilă, în condiții normale poate elibera ioni metale grele, reținute de aceste particule, crescând astfel riscul ca aceste substanțe să intre în corpul uman.

Ce este un surfactant biodegradabil?

Unul dintre principalele criterii pentru siguranța mediului înconjurător a substanțelor chimice de uz casnic este biodegradabilitatea agenților tensioactivi care sunt incluși în compoziția lor. Agenții tensioactivi sunt împărțiți în cei care sunt distruși rapid în mediu și cei care nu sunt distruși și se pot acumula în organisme în concentrații inacceptabile.

Mai mult, se face o distincție între biodegradabilitatea primară, ceea ce presupune modificări structurale Surfactanți de către microorganisme, ducând la pierderea proprietăților de suprafață active și biodegradabilitatea completă - biodegradarea finală a agenților tensioactivi la dioxid de carbon și apă. Doar agenții tensioactivi complet biodegradabili sunt siguri.

Doar unii surfactanți neionici, în primul rând cei obținuți din materii prime biologice, mai degrabă decât din produse petroliere, sunt 100% biodegradabili.

Bio-surfactant - ce este?

În 1995, ECOVER, împreună cu compania franceză Agro-Industrie Recherches et Développements (ARD), a participat la concursul european proiect de cercetare, al cărui scop a fost să învețe cum să sintetizeze agenți tensioactivi din deșeurile agricole, cum ar fi paiele și tărâțele de grâu. Proiectul a fost finalizat cu succes în 1999, iar producția la scară industrială a început în 2008.

În zilele noastre, bio-surfactanții formează baza întregii linii de detergenți de spălat vase marca ECOVER. Rezultatele testelor confirmă că astfel de agenți tensioactivi au un efect puternic de curățare, sunt complet biodegradabili și se caracterizează printr-o toxicitate scăzută. Este ca un basm în care paiele s-au transformat în aur, dar aceasta este o poveste adevărată.

Indicatori și contoare de alcool în aerul expirat și fluide biologice (sânge, urină, salivă)

Determinarea alcoolului în aerul expirat conform documente de reglementare Ministerul Sănătății din Rusia și Ministerul Sănătății al URSS este o procedură obligatorie în timpul unui examen medical pentru intoxicație.

În timpul unei examinări medicale, întrucât este inclusă în lista măsurilor de asigurare a procedurilor în cazul unei contravenții administrative, i.e. are forță legală, este permisă utilizarea numai a acelor produse și dispozitive care sunt aprobate pentru utilizare în practica medicală în modul prescris.

În sistemul de diagnostic de laborator, se face distincția între metodele de cercetare preliminare (calitative, de screening) și de confirmare (pentru alcool - cantitativ). Metodele preliminare pot fi folosite de polițiștii rutieri pentru a decide dacă este necesară trimiterea pentru o examinare medicală, timp în care, de regulă, se folosesc metode de cercetare confirmatoare (cantitative). Prin Ordinul Ministerului Sănătății și Dezvoltării Sociale din Rusia din 10 ianuarie 2006 nr. 1, metode preliminare pentru indicarea prezenței alcoolului în aerul expirat, împreună cu metode de confirmare (cantitative), permis pentru utilizare în timpul examinării medicale.

Produse medicale pentru screening (preliminare) determinare a alcoolului în aerul expirat, aprobate pentru uz medical

Un set de tuburi indicator pentru controlul sobrietății

Metoda se bazează pe reacția de oxidare a etanolului cu bicromat de potasiu ( K 2 Cr 2 O 7) în prezența acidului sulfuric concentrat, cunoscut sub numele de reacția Rappoport-Arkhangelova. În timpul oxidării moleculelor de etanol, ionii de crom cu o stare de oxidare de -6 sunt reduse la o stare de oxidare de -3 și, prin urmare, culoarea galbenă sau portocalie a reactivilor se schimbă în verde. Reactivii (o soluție de anhidridă cromică în acid sulfuric concentrat) sunt impregnați cu granule de silicagel, turnați într-un tub de sticlă etanș, cu crestături la ambele capete. Când este folosit, capetele tubului se desprind la crestături și persoana examinată suflă aer expirat prin el. Se evaluează vizual schimbarea culorii corespunzătoare cantității de etanol conținută în aerul expirat. Metoda este convenabilă și ușor de utilizat (pragul de detecție este de 0,2 ‰), dar are un dezavantaj semnificativ - neselectivitatea, deoarece o gamă largă de substanțe au un efect reducător similar cu etanolul. Astfel, culoarea reactivilor se schimbă în verde sub influența, pe lângă etanol, metanol, eteri, acetonă (care este deosebit de importantă dacă subiectul suferă de diabet), aldehide, hidrogen sulfurat și sub influența benzinei, terebentină, acid acetic, camfor, fenol, dicloroetan, reactivul devine maro, ceea ce nu permite detectarea prezenței etanolului. Din acest motiv, un procent mare din rezultatele obținute prin această metodă sunt fals pozitive sau fals negative.

Alarma de prag pentru vapori de etanol "Lion Alcoblow"

Principiul de funcționare este același cu cel al dispozitivelor digitale pentru determinarea cantitativă a alcoolului în aerul expirat produs de Lion, cu toate acestea, expirarea fără contact în acest caz oferă doar o preliminară rezultat de calitate. Sensibilitatea (0,1 ‰) este destul de suficientă pentru a detecta chiar și faptul că consumul de alcool nu există rezultate fals pozitive; Convenabil de utilizat, deoarece nu necesită piese bucale sterile înlocuibile.

Multe modificări moderne ale instrumentelor digitale pentru analiză cantitativă au un mod de screening ca mod suplimentar, bazat pe expirație fără contact și utilizat ca mod preliminar. În cazul unei reacții pozitive, dispozitivul trece automat în modul de analiză cantitativă. Acest sistem de testare economisește timp și piese bucale înlocuibile.

Dispozitive pentru măsurarea cantității (concentrației) de alcool, aprobate pentru utilizare în practica medicală

În prezent, dispozitivele sunt produse cu trei principii diferite de detectare.

Chimisorbția semiconductorilor. Când aerul care conține vapori de etanol trece prin camera detectorului, moleculele de etanol sunt adsorbite de stratul sensibil al detectorului, în urma căruia rezistența acestuia se modifică și, în consecință, forța care trece prin acest strat. curent electric. Aceste modificări sunt direct proporționale cu numărul de molecule de etanol care trec prin detector. Un exemplu de utilizare a unui detector cu semiconductor este analizorul Alert J4X (Canada).

Detectarea electrochimică se bazează pe procesul de oxidare-reducere a moleculelor de alcool pe electrozii de platină atunci când un curent electric trece prin ei. Astfel de detectoare sunt selective deoarece reacţionează numai la alcooli şi nu dau rezultate fals pozitive cu alţi compuşi volatili şi sunt extrem de sensibile şi de încredere. Detectoarele electrochimice sunt scumpe, dar utilizate pe scară largă în întreaga lume. Sunt echipate cu analizoare din seria Lion Alcometer (S-D2, SD-400, SD400P, 500) (Marea Britanie), seria Alcotest (Germania) și seria Alco-Sensor IV (SUA). Recent, a apărut și o modificare a dispozitivului Alert J4Xec, care este echipat cu un detector electrochimic.

Spectroscopie în lumină infraroșie (spectroscopie IR). Detectorul include o sursă de radiații IR, o lentilă de focalizare, filtre de lumină cu bandă îngustă și o fotocelulă foarte sensibilă. Analizorul Lion Intoxilyzer 8000 (Marea Britanie) folosește trei lungimi de undă: 3,80, 3,38 și 3,39 µm; Lion Intoxilyzer 8000 - doi: 3,4 și 9,36 microni; Dispozitiv AKPE-1 (firma META, Zhigulevsk, Rusia) - doar unul (3,4 microni).

O altă caracteristică importantă a unui detector este sensibilitatea acestuia. Pragul pentru concentrația de etanol detectabilă în mod fiabil este indicat în instrucțiunile pentru fiecare dispozitiv. Pentru a confirma diagnosticul " intoxicație cu alcool» nu este necesar un prag de sensibilitate scăzut al dispozitivului, deoarece, în majoritatea cazurilor, semnele clinice de intoxicație apar la o concentrație de etanol peste 0,5%, totuși, pentru a confirma faptul consumului de alcool, care este prevăzut în timpul unui examen medical în un număr de cazuri care nu au legătură cu conducerea, detectarea concentrațiilor mai mici este importantă.

Trebuie avut în vedere faptul că dispozitivele Lion Alcometer și Lion Intoxilyzer au o concentrație de etanol de prag de 0,5 ‰.

În cele din urmă, cele mai importante caracteristici ale dispozitivelor sunt stabilitatea și liniaritatea acestora, adică. proporționalitatea directă a semnalului detectorului cu cantitatea de etanol primit pe întregul interval de concentrații măsurate. Acești parametri sunt caracterizați de coeficientul de variație. Valorile ridicate ale coeficientului de variație sunt caracteristice dispozitivului Alert J4X.

Cele mai stabile rezultate se gasesc la Lion Intoxilyzer, echipat cu propriul sistem de termostat. Rezultate destul de satisfăcătoare din punct de vedere al liniarității și stabilității sunt date de dispozitivele cu detector electrochimic - Lion Alcometer și Alco-Sensor IV.

Nota: Dispozitivele și metodele medicale enumerate în această secțiune nu reprezintă o listă exhaustivă a dispozitivelor și metodelor aprobate pentru utilizare.

Metode de testare a aerului expirat și a fluidelor biologice pentru alcool folosind mijloace tehnice. Evaluarea rezultatelor.

Factori care afectează fiabilitatea rezultatelor (altele decât caracteristicile detectorului)

Raportul concentrației sânge/aer

Fezabilitatea determinării etanolului în aerul expirat se datorează prezenței unui direct dependență proporționalăîntre concentrațiile de etanol din sângele capilarelor alveolare și ale aerului alveolar, deoarece moleculele de etanol difuzează liber prin membranele celulare de-a lungul unui gradient de concentrație. Diferența nivelurilor de etanol din sânge și aer este asociată cu diferența de densități din aceste medii și este, prin urmare, o valoare constantă, egală, așa cum se consideră în majoritatea țărilor lumii, cu 2100.

Faza de expirare

Din cele de mai sus reiese clar că nivelul de etanol ajunge la echilibru în aerul alveolelor cu nivelul din sânge. În aerul căilor respiratorii superioare, conținutul de etanol este mai mic, cu atât distanța de la alveolele plămânilor este mai mare. S-a stabilit empiric că pentru a analiza o anumită porțiune de aer pulmonar este necesar să se îndepărteze 5 volume de spațiu mort, care este de aproximativ 150 ml, adică. Nu se analizează primii 750 ml de aer. Toate dispozitivele moderne sunt echipate cu senzori de măsurare care permit estimarea volumului de aer care trece prin ele și pornește automat procesul de analiză numai după ce un anumit volum de aer a fost evacuat din tractul respirator superior.

Etanol adsorbit în cavitatea bucală

Este bine cunoscut faptul că etanolul adsorbit de mucoasa bucală determină o supraestimare a rezultatelor analizei aerului expirat (precum și a salivei) în decurs de 10 - 20 de minute. Legat de aceasta este cerința de a repeta analiza aerului expirat după 20 de minute. Prezența etanolului adsorbit poate fi o consecință nu numai a consumului de băuturi alcoolice, ci și cantități minime medicamente care conțin alcool, care se întâmplă uneori în condiții premergătoare unui examen medical.

În primele 2 minute după consumul de alcool (inclusiv medicamentele care conțin alcool), concentrația de etanol din aerul expirat poate atinge cele mai înalte niveluri posibile. instrumente de măsurare valori, care în niciun caz nu se corelează cu intoxicația. Unele modele de analizoare moderne fac posibilă detectarea prezenței etanolului adsorbit pe mucoasa bucală prin abruptul creșterii nivelului de etanol pe măsură ce expirați.

Interpretarea rezultatelor analizei aerului expirat la diagnosticarea intoxicației cu alcool

După cum sa menționat mai sus, starea de intoxicație este cauzată de efectul etanolului asupra sistemului nervos central, iar severitatea simptomelor clinice de intoxicație depinde direct de concentrația de etanol din creier. Nivelul de etanol din organele alimentate intens cu sânge (creier, plămâni, rinichi) corespunde cel mai îndeaproape nivelului său din sângele arterial. Din acest punct de vedere, o analiză a aerului expirat, care arată conținutul de etanol din sângele capilarelor alveolare, este mai informativă decât o analiză directă a sângelui disponibil (venos sau capilar).

Trebuie avut în vedere faptul că toate datele indicative privind concentrația de etanol din sânge sunt calculate pentru sângele venos și nu arterial. Raportul de concentrație arterial-venoasă nu este constant și depinde de faza cinetică a etanolului, în timpul căreia se prelevează bioprobele. Severitatea simptomelor clinice datorate efectului de toleranță crescută depinde și de faza cinetică. În plus, stresul (o apariție frecventă în timpul examinărilor medicale) maschează adesea semnele clinice de intoxicație.

Metode de screening pentru stupefiante și substanțe psihotrope. Caracteristicile lor și evaluarea rezultatelor.

Analiza substanțelor psihoactive are unele trăsături specifice scopul ei este de a stabili faptul prezenței și (sau) utilizării acestora, i.e. există o orientare judiciar-juridică.

În conformitate cu cerințele de fiabilitate, fiabilitate și dovezi pentru rezultatele testelor, un studiu de laborator trebuie să conțină două etape - un studiu preliminar (sau așa-numitul studiu de screening) și un studiu de confirmare.

Astfel, testarea de laborator pentru prezența substanțelor psihoactive constă în două etape:

1) analiză preliminară - diverse metode imunochimice, cromatografie în strat subțire;

2) analiză de confirmare, cel mai adesea bazată pe cromatografie gazoasă-spectrometrie de masă, mai rar - cromatografia în gaz sau cromatografia lichidă de înaltă performanță.

Metodele preliminare sau de screening sunt simple și nu necesită pregătire complexă a probei sau mult timp. Scopul lor este de a identifica eșantioanele negative care sunt excluse de la analiza ulterioară. Probele pozitive sunt supuse unor investigații suplimentare folosind metode de confirmare.

În prezent, cele mai utilizate analize chimice și toxicologice pentru studiile de screening sunt analiza imunocromatografică (ICA) pe benzi de testare, testul fluoroimuno polarizant (PFIA) și testul imunosorbent legat de enzime (ELISA).

Metodele imunochimice moderne se disting prin sensibilitate ridicată, simplitate și rapiditate de execuție și, în același timp, fac posibilă analiza număr mare probe fără a necesita purificarea sau concentrarea probelor suplimentare sau speciale și, prin urmare, sunt convenabile pentru diagnosticarea de screening.

La primirea unui rezultat pozitiv, de ex. Când concentrația de substanță psihoactivă depășește pragul, este necesară testarea suplimentară a probei de urină cu metode alternative de confirmare.

Dacă rezultatul este negativ, nu sunt necesare alte teste pentru compusul sau grupul de substanțe analizat.

1. Metode imunochimice de analiză.

Metodele moderne de analiză imunochimică se bazează pe competiția dintre antigenul din proba de testat și antigenul marcat pentru un număr limitat de situsuri de legare pe anticorpi specifici. Metodele imunochimice au o serie de avantaje față de metodele fizico-chimice: o cantitate destul de mică de probă pentru analiză, rapiditate și ușurință de implementare, sensibilitate ridicată și practic nu există o etapă de pregătire a probei.

Toate probele care intră în laboratorul chimico-toxicologic trebuie să fie supuse testării imunochimice preliminare pentru principalele grupe de substanțe testate - cel mai adesea opiacee, amfetamine, canabinoizi. În acest caz, se folosesc seturi adecvate de reactivi. În plus, dacă este necesar și dacă este posibil, se pot face cercetări asupra altor grupe sau substanțe: benzodiazepine, barbiturice, metadonă, cocaină, fenciclidină, ecstasy, antidepresive triciclice. Pentru a analiza aceste substanțe, sunt produse benzi de testare și kituri de reactivi imunochimici adecvate pentru diferite analizoare.

Utilizarea sistemelor de testare disponibile public, care au devenit recent răspândite pentru diagnosticarea consumului de substanțe psihoactive, extinde posibilitățile de screening a studiilor în practica de laborator.

Analiza imunocromatografică (ICA) pe benzi de testare

Analizele imunocromatografice, sau așa-numitele benzi de testare, sistemele de testare, care fac posibilă detectarea utilizării substanțelor psihoactive și (sau) metaboliților acestora în urina umană în 5-10 minute, au devenit destul de răspândite. În etapa preliminară, un diagnostic atât de rapid și simplu, care nu necesită echipamente suplimentare, reactivi și abilități speciale, pot fi utile ca metodă auxiliară de screening. Bandelele de testare nu au scopul de a cuantifica nivelul de substanțe psihoactive din urină și nu sunt un test de confirmare.

Urina testată migrează de-a lungul benzii de testare din cauza forțelor capilare. Dacă proba conține substanța psihoactivă dorită sau metaboliții acesteia într-o concentrație care depășește nivelul prag stabilit pentru benzile de testare, compușii de testat reacţionează cu anticorpi specifici marcaţi cu particule de aur coloidal, formând un complex antigen-anticorp. Acest complex intră într-o reacție de legare competitivă cu antigenul imobilizat în zona de testare a benzii și nu are loc formarea unei benzi de colorare a culorii în zona de testare. Acest rezultat este considerat pozitiv.

În absența substanței dorite sau când concentrația acesteia este mai mică decât o valoare de prag, anticorpii marcați nelegați se leagă de antigenul imobilizat în zona de testare a benzii, formând o bandă colorată în această zonă. Acest rezultat este negativ.

În zona de control a benzii de testare, se formează întotdeauna o bandă colorată și servește drept control, ceea ce indică corectitudinea procedurii de testare și performanța componentelor sale.

Configurarea analizei.

1. Toate componentele testului și probei de urină trebuie încălzite la temperatura camerei înainte de testare.

2. Urina este colectată într-un recipient curat și uscat din plastic sau sticlă.

3. Deschideți pachetul de benzi de testare de-a lungul fantei fără a atinge suprafața de lucru a membranei.

4. Banda este îndepărtată și scufundată vertical în urină până la nivelul liniei limită timp de 30-60 de secunde.

5. Banda este îndepărtată din urină și plasată pe suprafata orizontala, după 5 minute se determină rezultatul analizei.

Interpretarea rezultatelor

Detectarea a două dungi roz de orice claritate și intensitate a culorii în zonele de testare și de control indică faptul că substanțele psihoactive necesare corespunzătoare sunt absente în proba de urină analizată sau concentrația lor este sub valoarea pragului.

Detectarea unei dungi roz de orice claritate și intensitate în zona de control și absența completă a celei de-a doua dungi în zona de testare indică prezența substanței psihoactive corespunzătoare în proba de urină analizată.

Dacă nu sunt detectate benzi în decurs de 5 minute sau dacă apare o bandă la nivelul zonei de testare, rezultatul nu este evaluat și testul se repetă folosind o nouă bandă de testare.

Unii producători de benzi de testare indică 100% fiabilitatea analizei. Acest lucru nu este adevărat, deoarece sunt cunoscute cazuri de rezultate fals pozitive la utilizarea benzilor de testare.

Inițial, testele imunocromatografice în diagnosticarea medicală au fost propuse a fi concentrate pe manipularea minimă și înregistrarea non-instrumentală de înaltă calitate a rezultatelor ca alternativă la metodele complexe de analiză staționară.

Atunci când se efectuează studii de screening folosind benzi de testare, este necesar să se înregistreze clar rezultatele testelor care reflectă datele înregistrate în mod obiectiv. Obiectivizarea evaluării rezultatelor cercetării poate fi asigurată prin utilizarea analizorului reflectometric intern „Reflekom” cu software-ul „Videotest” pentru computer, în care se pot stoca datele de înregistrare ale analizei imunocromatografice. Utilizarea tehnologiei de înregistrare fotometrică elimină elementul de subiectivitate la evaluarea rezultatelor analizei, vă permite să salvați rezultatele testelor atât sub forma unui document primar (imaginea unei benzi de testare), cât și a datelor procesate de computer și crește productivitatea analizei înregistrării. rezultate.

Testele rapide imunocromatografice (bandele de testare) sunt produse pentru a detecta conținutul de morfină (opiacee), amfetamină, metamfetamina, canabinoizi, cocaină (benzoilecgonină), metadonă, fenciclidină, benzodiazepine, barbiturice, ecstasy, antidepresive triciclice în urina umană. De asemenea, sunt produse sisteme multitest pentru detectarea simultană a 2, 3, 5 și 6 tipuri de substanțe psihoactive.

Testul fluoroimuno de polarizare (PFIA)

Unul dintre cele mai promițătoare tipuri de imunotest astăzi este versiunea sa omogenă - metoda PFIA cantitativă (semi-cantitativă), care se bazează pe principiul competiției dintre antigenul care se determină și antigenul marcat cu o etichetă fluorescentă de legare a anticorpului. Formarea unui imunocomplex este determinată prin măsurarea polarizării fluorescenței, care crește atunci când antigenul marcat se leagă de anticorpi. Detectarea grupului studiat de substanțe psihoactive se realizează la nivelul concentrației prag stabilite (Cut-off), adică. concentrație determinată în mod fiabil. Determinarea cantitativă se realizează în total (atât compuși nativi, cât și metaboliți) în raport cu concentrația substanței utilizate ca standard de referință.

Metoda PFIA este un imunotest omogen rapid, precis și ușor de reprodus, coeficientul de variație de obicei nu depășește 3% și care este doar puțin inferior ca sensibilitate la ELISA. Vă permite să determinați în câteva minute concentrația analitului într-un volum de probă de 50 până la 100 μl cu o limită de detecție de 10-50 ng/ml și o concentrație de prag de 25-300 ng/ml. Analiza este efectuată automat pe analizoarele TDx, FLx de la Abbott (SUA).

Abbott produce aproximativ 20 diverse tipuri truse pentru determinarea diferitelor substanțe și (sau) metaboliți ai acestora în urină și ser sanguin: opiacee, amfetamină/metanfetamină, canabinoizi, metabolit cocaină (benzoilecgonină), fenciclidină, metadonă, barbiturice, benzodiazepine, antidepresive triciclice, nortriptilina, fenoxifeniptilina, amitriptilină, desipramină, imipramină, carbamazepină, etanol.

Testul imunosorbent legat de enzime (ELISA)

În țara noastră s-au folosit metode ELISA eterogene, folosind anticorpi marcați și anticorpi anti-specie pentru identificarea celor care formează imunocomplexuri specifice. Metoda utilizează antigene imobilizate (datorită sorbției) pe suprafața purtătorilor solizi, urmată de legarea specifică a compusului analizat pe un imunosorbant și detectarea imunocomplexelor formate.

Formarea unui complex imunospecific are loc pe un suport solid. Avantajul versiunii în fază solidă a ELISA este specificitatea și sensibilitatea sa ridicată, comparabile cu cromatografia în gaz-spectrometrie de masă.

Detectarea rezultatelor studiilor metodelor de imunotest enzimatic se realizează vizual sau folosind complexe hardware pentru măsurare densitatea optică soluții (cititoare verticale).

In prezent se produc reactivi ELISA gata preparati care permit detectarea urmatoarelor substante si grupe principale de substante: opiacee, canabinoizi, amfetamine, cocaina (benzoilecgonina), benzodiazepine, fenobarbital, fenciclidina, fentanil/trimetilfentanil, clonidina.

Este recomandabil să se utilizeze astfel de sisteme de testare ELISA pentru analiza obiectelor biologice netradiționale: saliva, părul, unghiile.

2. Cromatografia în strat subțire

Cromatografia în strat subțire (TLC) este utilizată în primul rând ca test preliminar, dar poate fi folosită și ca test de confirmare în combinație cu testarea imunochimică.

Principiul TLC este procesele fizico-chimice bazate pe repetarea repetată a actelor de sorbție și desorbție a unei substanțe sau a unui grup de substanțe atunci când acestea se deplasează în faza mobilă de-a lungul fazei staționare, având ca rezultat formarea de zone de concentrare a substanțelor. În cromatografia în strat subțire, mai mulți microlitri din extractul obținut în timpul preparării probei sunt plasați pe linia de start a plăcii (un substrat solid cu un strat subțire de sorbant aplicat pe acesta). Placa de cromatografie este plasată într-o cameră închisă ermetic, care conține un amestec de solvenți în partea de jos, numit sistem de solvenți. Sub acțiunea forțelor capilare, solventul se deplasează de-a lungul stratului absorbant și transportă componentele amestecului analizat la viteze diferite, ceea ce duce la separarea acestora. Zonele de concentrare se formează sub formă de pete rotunde. Vizualizarea se realizează prin tratarea plăcii cu reactivi cromogeni. Identificarea componentelor amestecului se realizează prin compararea lungimii drumului substanței (Rf) cu cea a substanței de referință („etichetă”).

Principalele avantaje ale metodei de cromatografie în strat subțire sunt versatilitatea sistemului cromatografic, capacitatea de a evalua vizual separarea rezultată și, deoarece componentele probei rămân în stratul absorbant, este posibil să se separe multe probe pe o singură placă, ceea ce duce la costul scăzut al analizei. Există și unele dezavantaje: rezoluție limitată din cauza lungimii scurte a secțiunii de separare, sensibilitate insuficientă de determinare, dependența rezultatelor de mediu.

Rezultatele unui studiu cromatografic trebuie să fie confirmate prin alte metode sau să utilizeze cel puțin 2 metode de cercetare diferite, de exemplu, PFIA și ICA.