În 1904, a dezvoltat o nouă metodă originală de autoradiografie, care a făcut posibil să se ia în considerare ce țesuturi absorb emanația de radiu într-o măsură mai mare. El a descoperit că sub influența razelor de radiu, cele mai timpurii și mai pronunțate modificări patohistologice apar în organele hematopoietice, genitale și limfoide. E. S. London împreună cu N. P. Kochneva au dezvoltat o metodă de vasostomie (angiostomie) - impunerea de fistule permanente pe vasele venoase mari, ceea ce face posibilă studierea metabolismului organelor individuale pe baza analiza comparativa sângele care curge către și care curge din ele în condiții naturale și în diverse condiții patologice fără a perturba relațiile dintre organe și reglarea neuroumorală. Un mare impuls în dezvoltarea patologiei generale și crearea unei fundații teoretice pentru medicina clinică a fost Școala de patologi și fiziopatologi din Moscova, fondată de profesorul A. B. Fokht. În 1890, a organizat Institutul de Patologie Generală și Experimentală la Universitatea Imperială din Moscova, iar în 1912 - un institut similar al Cursurilor Superioare pentru Femei din Moscova la Spitalul 2 al orașului (acum Departamentul de Fiziopatologie al Universității Medicale de Stat din Rusia).

Cu încercarea de a stabili tipare generale, caracteristic diverselor boli, a ieșit din postura de nervi la începutul anilor ’30. elev al lui I. P. Pavlov A. D. Speransky. Pe baza unei serii de studii începute în 1927, el a demonstrat că mecanismele reflexe, care sunt de natură nespecifică și provoacă leziuni stereotipe ale organelor corespunzătoare, participă la patogeneza proceselor patologice, inclusiv a celor infecțioase și toxice. A.D. Speransky a numit aceste modificări identice forme standard de distrofii nervoase.

A.D.Speransky s-a concentrat pe studiul nu iritanților, ci iritațiilor, ținând cont de faptul că reacțiile organismului sunt rezultatul integrității sale biologice, apărute în procesul de evoluție în legătură cu dezvoltarea sistemelor corelative, și mai ales a sistemului nervos. unu.

Disfuncție de reglare nervoasă...

Tulburări ale reglării nervoase În mecanismul de dezvoltare a atrofiei și distrofiei, un rol important revine tulburării reglării nervoase și umorale. funcții celulare. Fiziologul francez F. Magendie în 1824 a stabilit pentru prima dată prezența unui efect direct sistem nervos pe celule.

Metoda autoradiografiei

Autoradiografie, definiție, istorie.

Metoda autoradiografiei se bazează pe introducerea în obiectul studiat a unui compus „etichetat” cu un atom radioactiv și identificarea locului de includere a acestuia prin înregistrarea fotografică a radiației. Baza pentru obținerea unei imagini este efectul particulelor ionizante formate în timpul dezintegrarii unui atom radioactiv asupra unei emulsii fotografice nucleare care conține cristale de halogenură de argint.

Descoperirea metodei autoradiografiei este direct legată de descoperirea fenomenului de radioactivitate. În 1867 a fost publicată prima observație a efectului sărurilor de uraniu asupra halogenurilor de argint (Niepce de St. Victor). În 1896, Henry Becquerel a observat iluminarea unei plăci fotografice cu săruri de uraniu fără expunere prealabilă la lumină. Acest experiment este considerat momentul descoperirii fenomenului de radioactivitate. Autoradiografia în raport cu materialul biologic a fost folosită pentru prima dată de Lacassagne și Lattes (Lacassagne, Lattes 1924) în anii 20 ai secolului trecut; Blocul histologic din diferite organe animale, după introducerea izotopilor, a fost presat cu partea sa plată pe placa de raze X și expus. O secțiune histologică a fost obținută în prealabil și supusă unei proceduri standard de colorare. Autograful rezultat a fost studiat separat de felie. Această metodă vă permite să estimați intensitatea încorporării unui izotop într-o probă biologică. În anii patruzeci, Leblond a folosit autoradiografia pentru a demonstra distribuția izotopului de iod în secțiuni ale glandei tiroide (Leblond C.P. 1943).

Primele încercări de a combina autoradiografia cu microscopia electronică au fost făcute în anii 50 (Liquir-Milward, 1956). Autoradiografia microscopică electronică este un caz special de autoradiografie convențională, în care se numără și boabele de argint și se ia în considerare distribuția lor. Particularitatea metodei este utilizarea unui strat foarte subțire de emulsie. În prezent, s-a atins o rezoluție de aproximativ 50 nm, care este de 10-20 de ori mai mare în comparație cu microscopia cu lumină.

În prezent, metoda autoradiografiei a fost completată de posibilitatea evaluării automate a numărului de boabe de argint cu ajutorul analizoarelor video. Adesea, pentru a amplifica semnalul unei etichete (de obicei, aceștia sunt izotopi cu energii mari), se folosesc diverse tipuri de scintilatoare, depuse pe plăci (ecran de intensificare cu un strat de fosfor) sau impregnate într-o emulsie (PPO) - în acest caz , radiația fotonică luminează o placă sau o peliculă fotografică obișnuită.

Principiul fotografic al obținerii unei imagini, emulsie foto

În cercetarea radiografică, rolul unui detector de dezintegrare nucleară este jucat de o emulsie fotografică, în care, la trecerea unei particule ionizante, rămâne o imagine latentă, care este apoi dezvăluită în timpul procesului de dezvoltare, similar procesării filmului fotografic obișnuit.

O emulsie fotografică este o suspensie de microcristale de halogenură de argint în gelatină. Microcristalele au defecte în structura lor numite centri de sensibilitate. Conform modelului Gurney-Mott, aceste perturbări în rețeaua ionică a cristalului sunt capabile să capteze electroni eliberați atunci când o particulă alfa sau beta trece prin banda de conducere a cristalului, determinând transformarea ionului într-un atom. Imaginea latentă rezultată poate fi dezvăluită printr-o procedură care transformă cristalele de halogenură de argint activate în granule de argint metalic (un proces numit dezvoltare chimică). Orice agent cu activitate reducătoare suficientă poate fi utilizat ca revelator (de obicei, metol, amidol sau hidrochinonă sunt utilizate în fotografie și autoradiografie). După ce cristalele expuse sunt dezvoltate, microcristalele rămase de halogenură de argint sunt îndepărtate din emulsie folosind un fixativ (de obicei hiposulfit). Emulsiile fotografice nucleare se caracterizează prin rezoluție (granulație) și sensibilitate. Prima este determinată de dimensiunea microcristalelor de sare de argint și este invers proporțională cu cea din urmă. Emulsia fotografică se caracterizează printr-o sensibilitate redusă la lumina vizibilă, dar lucrul cu ea, totuși, trebuie făcut în întuneric pentru a preveni apariția artefactelor.

Emulsia poate fi aplicată pe medicament sub formă de film finit cu un substrat sau prin scufundarea medicamentului într-o emulsie lichidă încălzită - astfel se obține un strat subțire, uniform, care se dezvoltă în mod obișnuit. Înainte de aplicarea emulsiei pentru microscopie ușoară, lama este colorată de obicei cu colorația histologică necesară, dar într-o culoare mai deschisă decât de obicei pentru a permite numărarea granulelor de argint în toate zonele. Medicamentul este expus pentru un anumit timp și apoi dezvoltat.

Izotopi utilizați în autoradiografie.

În radioautografie, în funcție de scopurile studiului și materialele disponibile, este posibil să se utilizeze diverși izotopi. Imaginea creată de o particulă ionizantă pe o emulsie fotografică nucleară depinde de energia particulei și de tipul interacțiunii acesteia cu materia.

Particulele alfa emise de nuclee radioactive identice au aceeași energie ( E) și aceeași lungime a drumului ( R) , înrudit prin următoarea relație:

R = kE 3/2

Unde k – o constantă care caracterizează mediul în care se propagă particulele. Gama de particule din miez este determinată de densitatea și compoziția sa elementară. Relația Bragg-Kleemen permite utilizarea intervalului de particule alfa din aer (R 0) pentru a estima intervalul într-o substanță cu masă atomică A și densitate d:

R= 0,0003 (R 0 / d) A 1/2

Deoarece capacitatea de ionizare a particulelor alfa este foarte mare, aceasta facilitează înregistrarea fotografică a distribuției izotopilor și, de asemenea, permite utilizarea materialelor fără emulsie pentru înregistrare. O urmă de particule alfa emisă de o singură sursă apare pe autografe ca un fascicul de segmente drepte, de obicei lungi de 15-50 de microni, care emană dintr-un punct, ceea ce face posibilă localizarea cu precizie a zonei în care este inclusă eticheta radioactivă. Cu toate acestea, particulele alfa sunt emise de izotopi cu numere atomice mari, ceea ce limitează utilizarea lor ca marker biologic.

Urmele de particule alfa sunt adesea observate în radiografiile histologice ca un artefact - rezultatul emisiei intrinseci a izotopilor prezenți în diapozitiv.

Trecerea particulelor beta și a electronilor monoenergetici prin materie este însoțită de două tipuri principale de interacțiuni. Atunci când interacționează cu un electron orbital, o particulă îi poate transfera energie suficientă pentru a ioniza atomul (scoate un electron de pe orbită). În cazuri rare, această energie este atât de mare încât poate fi observată traseul electronului eliberat. Datorită egalității maselor particulei și electronului, are loc o abatere de la mișcarea inițială. Interacțiune de al doilea tip, cu nuclee atomice, duce la apariția radiațiilor de raze X bremsstrahlung. Deși acesta din urmă nu este înregistrat de emulsie, actul de interacțiune al unei particule cu un nucleu poate fi detectat printr-o rupere bruscă a traiectoriei.

Interacțiunea repetată cu electronii orbitali are ca rezultat o curbură a traiectoriei, care de obicei arată ca o linie sinuoasă, mai ales în partea finală, când viteza particulei scade și puterea de ionizare a acesteia crește. Lungimea traiectoriei depășește vizibil distanța de la începutul până la punctul final al pistei - kilometraj. Din acest motiv, chiar și electronii monoenergetici se caracterizează prin prezența unui spectru de gamă limitat mai sus de R max, caracteristic unei radiații date. Datorită pierderilor de ionizare mai mici, particulele beta sunt mai greu de detectat decât particulele alfa. Ele nu formează urme continue (cu excepția celei mai moi radiații de tritiu - cu toate acestea, în acest caz probabilitatea de a trece mai mult de un cristal de emulsie este scăzută), densitatea și numărul de cristale dezvoltate variază în limite diferite. Intervalul unei particule beta dintr-un alt element poate fi estimat folosind formula:

R = R A1 (Z/A) A1 / (Z/A)

Peste o gamă largă de valori E max Kilometrajul maxim este legat de energia maximă prin relația:

R m= 412 E max 1,265 – 0,0954 ln E max

Diferențele dintre intervalele, capacitatea de ionizare și densitatea cristalelor de emulsie dezvoltate de particule cu energii diferite pot fi utilizate pentru a discrimina distribuția elementelor dacă izotopii acestora diferă semnificativ în E max, ca în cazul tritiului și 14 C. Discriminarea distribuția a doi izotopi se realizează prin aplicarea pe o probă a două straturi de emulsie, primul strat înregistrează predominant radiații moi, al doilea – radiații dure. Conform unor studii, diferiți izotopi pot fi distinși în mod fiabil prin dimensiunea cristalelor de emulsie dezvoltate - cristalele afectate de particulele de tritiu beta, care are o capacitate de ionizare mai mare, sunt mai mari.

Electronii de conversie internă se formează prin absorbția unui quantum gamma cu o energie de radiație foarte scăzută și îndepărtarea unui electron din învelișul interior al unui atom. Acești electroni sunt similari cu particulele beta moi, dar spre deosebire de acestea din urmă sunt monoenergetici. Prezența electronilor de conversie internă permite utilizarea izotopilor precum 125 I.

În prezent, cei mai des utilizați izotopi sunt cei care emit particule beta. De regulă, tritiul este utilizat pentru etichetare în studiile histologice. Primele autografe folosind tritiu au fost făcute încă din anii 50 (Fitzgerald et al. 1951), dar utilizarea sa pe scară largă a început după ce timidina marcată cu tritiu a fost obținută la Laboratorul Brookhaven. Deoarece hidrogenul face parte din toate materie organică, apoi, folosind tritiu, este posibil să se obțină o varietate de compuși care poartă o etichetă radioactivă. Cu cât energia particulei emise este mai mică, cu atât este mai scurtă urma lăsată de aceasta atunci când se deplasează în emulsia fotografică și cu atât mai precis poate fi localizată locația atomului marcat. Lungimea traseului particulelor de tritiu beta este de aproximativ 1-2 microni, cea mai probabilă energie este de 0,005 MeV, iar traseul constă în cele mai multe cazuri dintr-un singur grăunte de argint, ceea ce face posibilă localizarea sursei de radiație nu numai în dimensiuni relativ mari. structuri celulare, cum ar fi nucleul, dar și în cromozomi individuali.

Introducerea metaboliților „etichetați” în organism face posibilă urmărirea încorporării izotopului în celulele țesuturilor animale, ceea ce face posibilă studierea unei varietăți de procese biochimice într-un organism viu.

Obținerea de date absolute - concentrația unei substanțe marcate în obiectul studiat - este rareori scopul cercetării autoradiografice; aceasta necesită cunoașterea unui număr de condiții, a căror determinare este dificilă. Prin urmare, studiile de autoradiografie cantitativă sunt de obicei efectuate prin compararea concentrației de boabe de argint peste obiectul studiat și controlul și este convenabil să luăm datele de control ca una sau 100%.

Caracteristicile unor izotopi utilizați

în autoradiografia obiectelor biologice

Particulele beta de fosfor radioactiv sunt capabile să zboare într-o emulsie nucleară pe distanțe de până la câțiva milimetri; pista constă din zeci de particule de argint puțin localizate - astfel, fosforul radioactiv poate fi folosit doar pentru a studia distribuția izotopului în țesuturi; localizarea în structurile celulare individuale nu poate fi stabilită.

Sulful radioactiv și carbonul pot fi utilizate pentru a localiza izotopul pe celule individuale, cu condiția ca acestea să fie mari sau suficient de distanțate, ceea ce poate fi realizat în frotiuri de sânge sau suspensii de celule.

Rezoluție și erori de metodă, erori de metodă.

Eroare geometrică– datorită faptului că particula emisă poate fi îndreptată sub orice unghi față de suprafața fotostratului. În consecință, bobul de argint din fotostratul poate să nu fie situat exact deasupra atomului radioactiv, ci mai mult sau mai puțin deplasat în funcție de direcția de mișcare a particulei și de lungimea drumului (energie).

Eroare foto apare din cauza faptului că un grăunte de argint, format din mii de atomi de metal, este mult mai mare decât un atom radioactiv. Astfel, locația obiectului mai mic trebuie judecată în funcție de poziția celui mai mare.

Atunci când se utilizează tritiu, care se caracterizează prin energie scăzută (gamă) de particule emise și emulsii nucleare cu dimensiuni reduse ale granulelor, rezoluția metodei de autoradiografie se află în rezoluția sistemelor optice - 1 micron. Astfel, aceste erori nu au un impact semnificativ asupra rezultatelor obținute.

Pentru a obține o rezoluție mai bună, este necesar să reduceți grosimea feliei, stratul de emulsie și distanța dintre ele. Medicamentul trebuie să fie ușor subexpus.

Efect de absorbție automată: Numărul de boabe de argint depinde de gradul de absorbție a radiațiilor de către structurile celulare, datorită intervalului scurt și energiei scăzute a particulelor beta, absorbția lor în țesuturi este destul de mare, ceea ce poate duce la pierderea semnului, prin urmare important Se pune întrebarea despre grosimea secțiunilor. S-a demonstrat că numărul de boabe de argint este proporțional cu radioactivitatea țesutului doar atunci când grosimea secțiunii nu este mai mare de 5 μm.

Număr relativ de particule beta care trec printr-un strat absorbant de grosime X poate fi estimat folosind legea lui Beer -

N X/N 0 = e - m X

Unde m este coeficientul de absorbție (valoarea reciprocă cu grosimea stratului, în timpul trecerii căruia numărul de particule scade cu e o singura data. Coeficientul de absorbție poate fi estimat aproximativ din valoarea lui R m(interval maxim), cunoscut pentru toți izotopii, folosind relația m R m= 10, care este valabil pentru radiații nu prea dure.

Dacă n particule care se deplasează spre suprafață apar într-un strat de grosime unitară pe unitate de timp, atunci într-o probă cu grosime X N particule vor ajunge la suprafață:

Fundal și artefacte: Erorile în măsurători pot fi introduse și de influențe mecanice - zgârieturi, fisuri în emulsie, ducând la formarea unei imagini latente și radiații de fundal, care trebuie luate în considerare la prelucrarea autoradiografiilor. Fondul este luat în considerare prin numărarea numărului de boabe de argint într-o zonă goală a preparatului. Se introduc erori și ca urmare a prelucrării histologice a secțiunilor - prelucrare în alcooli (deshidratare), înglobare în parafină, colorare. Aceste proceduri pot afecta dimensiunile și raporturile structurilor celulare.

Efectul radiațiilor al metaboliților marcați: Datorită energiei sale scăzute de radiație, tritiul provoacă ionizare semnificativă în celulă, mult mai mare decât efectul de radiație al particulelor beta de carbon. Ca rezultat, cu expunerea prelungită la un compus marcat, de exemplu 3H-timidină, are loc distrugerea și moartea celulelor, ceea ce duce la încetarea creșterii tisulare. În primul rând, spermatogeneza este perturbată. Există dovezi ale efectelor mutagene și carcinogene ale metaboliților marcați. Modificările citologice observate includ întreruperea trecerii celulelor prin ciclul mitotic, modificări ale ploidiei celulare și apariția aberațiilor cromozomiale. Dar, aparent, efectul dăunător al izotopului asupra celulelor poate afecta semnificativ rezultatele studiului numai în condiții experimentale pe termen lung.

Evaluarea cantitativă a radioactivității

De regulă, experimentul determină nu cantitatea absolută, ci cantitatea relativă a izotopului inclus. Gradul de încorporare a mărcii poate fi evaluat în două moduri - densitometric - care este mai aplicabil la macroautografe și la numărarea directă a boabelor de argint peste obiecte. Această procedură intensivă în muncă poate fi acum efectuată folosind un computer. O imagine digitală a unui specimen histologic este procesată de un software special pentru a selecta automat celulele și structurile celulare și pentru a număra numărul de boabe de argint. Dacă se pune problema evaluării cantitative, este necesar să se implice conceptul de eficiență. Cel mai adesea, eficiența este înțeleasă ca numărul de boabe de argint formate în timpul detectării unei dezintegrari radioactive. Eficacitatea metodei este influențată de mulți factori, în primul rând grosimea obiectului și emulsia.

În studiile care au folosit un contor de scintilație, s-a găsit o corelație ridicată între numărul mediu de dezintegrari pe minut și numărul de boabe de argint. Conform lui Hunt (Hunt și Foote, 1967), formarea unui bob în emulsia utilizată în experiment corespunde la 5,8 dezintegrari radioactive, adică eficiența metodei este de 17,8%.

Pentru cuantificarea tritiului din preparatele macroscopice se pot folosi probe cu activitate standard, care sunt montate pe acelasi autograf.

Evaluarea precisă a radioactivității obiectelor biologice comparate este foarte dificilă.

Un exemplu clasic de cercetare autoradiografică este munca privind acumularea de 32 P în ADN-ul celulelor rădăcinii de fasole (Howard, Pelc, 1953). În acest experiment, s-a demonstrat pentru prima dată împărțirea ciclului mitotic în patru perioade (mitoză - M, G 1 - perioada presintetică, S - sinteza ADN, perioada premitotică G 2), că perioada de sinteză a ADN-ului ocupă o perioadă limitată. parte a interfazei, fiind separate în timp de începutul și sfârșitul mitozei. Datele lui Howard și Pelka au fost ulterior confirmate în experimente mai precise folosind un precursor ADN specific - 3H-timidină.

Metode de evaluare a sintezei proteinelor. Cei mai comuni precursori pentru evaluarea sintezei totale a proteinelor în studiile autoradiografice sunt 3H-leucina, 3H-metionina, 3H-fenilalanina. De exemplu, sinteza de proteine ​​totaleîn creierul șobolanilor în primele săptămâni de dezvoltare postnatală (Pavlik și Jakoubek, 1976). Pentru a studia sinteza histonelor și efectul lor asupra reglarii transcripției, se folosesc aminoacizii de bază 3 H-lizină și 3 H-arginina, iar 3 H-triptofan este utilizat pentru studiul sintezei proteinelor acide. Densitatea de includere a etichetei de aminoacizi corespunde intensității sintezei proteinelor și, prin urmare, reflectă activitatea funcțională a neuronului. Metoda autoradiografică permite compararea caracteristicilor sintezei proteinelor în diferite țesuturi ale animalelor aflate sub influență experimentală și permite urmărirea dinamicii modificărilor la nivelul tipurilor individuale de celule și structurilor celulare (nucleu, corp celular, procese neuronale - axonale). transport).

În prezent, autoradiografia este adesea folosită pentru a studia creierul în studiile care utilizează radioliganzi la anumiți receptori. În acest fel, au fost construite hărți ale distribuției diverșilor receptori în structurile creierului animalelor și oamenilor.

Autoradiografia este, de asemenea, utilizată pentru vizualizarea gelurilor în biochimie și în combinație cu metode imunologice (RIA).

Referinte:

1. Epifanova O.I. şi altele.Radioautografia M., „Școala superioară”, 1977

2. Sarkisov D.S. Perov Yu.L. Tehnologia microscopică M.: „Medicina”, 1996

3.Rogers A.W. Autoradiografie practică, Amersham Marea Britanie, 1982

4. Bokshtein S.Z. Ginzburg S.S. și altele.Autoradiografia microscopică electronică în metalurgie, M., „Metalurgie”

Autoradiografie

autoradiografie, radioautografie, o metodă de studiere a distribuției substanțelor radioactive în obiectul studiat prin aplicarea unei fotoemulsii sensibile la radiațiile radioactive asupra obiectului. Substanțele radioactive conținute în obiect par să se fotografieze singure (de unde și numele). Metoda A. este utilizată pe scară largă în fizică și tehnologie, în biologie și medicină – oriunde se folosesc indicatori izotopi.

Dupa dezvoltarea si fixarea emulsiei fotografice pe aceasta se obtine o imagine care afiseaza distributia studiata. Există mai multe moduri de a aplica emulsie fotografică pe un obiect. Placa fotografică poate fi aplicată direct pe suprafața lustruită a probei sau poate fi aplicată o emulsie lichidă caldă pe eșantion, care, atunci când se solidifică, formează un strat strâns adiacent probei și este examinată după expunere și fotoprocesare. Distribuția substanțelor radioactive este studiată prin compararea densității de înnegrire a filmului fotografic din probele de testare și de referință (așa-numita macroradiografie). A doua metodă constă în numărarea urmelor formate de particulele ionizante într-o emulsie fotografică cu ajutorul unui microscop optic sau electronic (microradiografie). Această metodă este mult mai sensibilă decât prima. Pentru obținerea macroautografelor se folosesc folii transparente și emulsii de raze X, iar pentru microautografe se folosesc emulsii speciale cu granulație fină.

O imagine fotografică a distribuției substanțelor radioactive în obiectul studiat, obținută prin metoda A., se numește autoradiogramă, sau autoradiograf.

Pe orez. 12 Și 3 sunt date exemple de autoradiograme. Metoda A. poate fi utilizată pentru a detecta prezența elementelor radioactive în diverse minereuri, distribuția elementelor radioactive naturale în țesuturile organismelor vegetale și animale etc.

Introducerea compușilor marcați cu radioizotopi în organism și studiul suplimentar al țesuturilor și celulelor folosind metoda A. permite obținerea de date precise despre celulele sau structurile celulare specifice care au loc anumite procese, localizarea anumitor substanțe și stabilirea parametrilor de timp. a unui număr de procese. De exemplu, utilizarea fosforului radioactiv și A. a făcut posibilă detectarea prezenței metabolismului intensiv în osul în creștere; utilizarea iodului radioactiv și A. a făcut posibilă clarificarea tiparelor de activitate ale glandei tiroide; introducerea compușilor marcați - precursori ai proteinelor și acizilor nucleici, iar A. a contribuit la clarificarea rolului în schimbul acestor elemente vitale. conexiuni importante anumite structuri celulare. Metoda A. face posibilă determinarea nu numai a localizării unui radioizotop într-un obiect biologic, ci și a cantității acestuia, deoarece numărul de boabe de argint reduse ale unei emulsii este proporțional cu numărul de particule care acționează asupra acesteia. Analiza cantitativă a macroautografelor este efectuată folosind tehnici de fotometrie convenționale (vezi Fotometrie) , și microautografe - prin numărarea grăunților de argint sau a urmelor la microscop care au apărut în emulsie sub influența particulelor ionizante. A. începe să fie combinat cu succes cu microscopia electronică (vezi Microscopia electronică). Vezi și Radiografie.

Lit.: Boyd D. A. Autoradiografia în biologie și medicină, trad. din engleză, M., 1957; Zhinkin L.N., Aplicarea izotopilor radioactivi în histologie, în cartea: Indicatori radioactivi în histologie, L., 1959, p. 5-33; Perry R., Autoradiografie cantitativă, Methods in Cell Physiology, 1964, v. eu, cap. 15, p. 305-26.

N. G. Hrușciov.

Orez. 2. Autoradiogramă (amprentă) care arată distribuția fosforului (32 P) în frunzele de roșii. Planta a fost plasată mai întâi într-o soluție care conținea fosfor radioactiv. Zonele luminoase corespund unor concentrații crescute ale izotopului radioactiv; se poate observa că fosforul este concentrat în apropierea tulpinii și în părțile vasculare ale frunzelor.

Orez. 1. Microradiograma unei probe de nichel. Se studiază difuzia staniului marcat cu izotopul radioactiv 113 Sn în nichel. Distribuția staniului radioactiv arată că difuzia are loc în principal de-a lungul limitelor granulelor de nichel.


Mare Enciclopedia sovietică. - M.: Enciclopedia Sovietică. 1969-1978 .

Sinonime:

Vedeți ce este „Autoradiografia” în alte dicționare:

    - (din auto... și radiografie) o metodă de înregistrare a distribuției substanțelor radioactive într-un obiect. Pe suprafață se aplică (tăiat) un film cu o emulsie sensibilă la radiațiile radioactive. Substanțele radioactive par să se fotografieze singure... ... Mare Dicţionar enciclopedic

    - (autradiografie), o metodă de măsurare a distribuției radioactelor. in in in obiectul studiat (prin propria radiatie), care consta in aplicarea unui strat de emulsie fotografica nucleara asupra acestuia. Distribuția este determinată de densitatea înnegririi manifestată... ... Enciclopedie fizică

    O metodă pentru studierea distribuției substanțelor radioactive (izotopi) în obiectul sau compușii studiati. Constă în aplicarea unei fotoemulsii sensibile la radiațiile radioactive pe un obiect (sau, de exemplu, o cromatogramă) și obținerea unei amprente,... ... Dicţionar de microbiologie

    Substantiv, număr de sinonime: 4 autoradiografie (2) macroautoradiografie (1) ... Dicţionar de sinonime

    Autoradiografie. Vezi autoradiografie. (Sursa: Anglo Russian Dicţionar termeni genetici”. Arefiev V.A., Lisovenko L.A., Moscova: Editura VNIRO, 1995) ... Biologie moleculara si genetica. Dicţionar.

    autoradiografie- Metodă de studiere a distribuţiei radioactelor. componentele din proba studiată prin propria radiație prin aplicarea unei radioactivitati sensibile la eșantion. radiații de emulsie. Distribuția este determinată de densitatea înnegririi manifestată... ... Ghidul tehnic al traducătorului

    Autoradiografie- * autoradiografie * autoradiografie vezi... Genetica. Dicţionar enciclopedic

    - (din auto... și radiografie), o metodă de înregistrare a distribuției substanțelor radioactive într-un obiect. Pe suprafață se aplică (tăiat) un film cu o emulsie sensibilă la radiațiile radioactive. Substanțele radioactive par să se fotografieze singure... ... Dicţionar enciclopedic

Cărți

  • Autoradiografia în biologie și medicină, J. Boyd, Cartea aparține unuia dintre creatorii metodei autoradiografiei. Primele opt capitole sunt dedicate teoriei problemei. Ei discută despre teoria procesului fotografic, proprietăți și caracteristici... Categorie: Cunoștințe medicale de bază Editor:

Autoradiogr A fiya, autoradiografie, autoradiografie , o metodă de studiere a distribuției substanțelor radioactive în obiectul studiat prin aplicarea unei fotoemulsii sensibile la radiațiile radioactive asupra obiectului. Substanțele radioactive conținute în obiect par să sa faca poze cu ei insisi(de aici și numele). Metoda autoradiografiei este utilizată pe scară largă în fizică și tehnologie, în biologie și medicină - oriunde se folosesc indicatori izotopi.

Dupa dezvoltarea si fixarea emulsiei fotografice pe aceasta se obtine o imagine care afiseaza distributia studiata. Există mai multe moduri de a aplica emulsie fotografică pe un obiect. Placa fotografică poate fi aplicată direct pe suprafața lustruită a probei sau poate fi aplicată o emulsie lichidă caldă pe eșantion, care, atunci când se solidifică, formează un strat strâns adiacent probei și este examinată după expunere și fotoprocesare. Distribuția substanțelor radioactive este studiată prin comparație densitatea de înnegrire a filmului fotografic din probele de testare și de referință(așa-numita macroradiografie).

A doua metodă constă în numărarea urmelor formate de particule ionizante într-o emulsie fotografică folosind optic sau microscop electronic (microradiografie). Această metodă este mult mai sensibilă decât prima. Pentru obținerea macroautografelor se folosesc folii transparente și emulsii de raze X, iar pentru microautografe se folosesc emulsii speciale cu granulație fină.

Se numește o imagine fotografică a distribuției substanțelor radioactive în obiectul studiat, obținută prin autoradiografie autoradiogramă sau autorradiografie.

Introducerea compușilor marcați cu radioizotopi în organism și examinarea ulterioară a țesuturilor și celulelor prin autoradiografie permite:

  • obţine informaţii exacte despre care celule sau structuri celulare, apar anumite procese,
  • anumite substanțe sunt localizate,
  • setați parametrii de sincronizare ai unui număr de procese.

De exemplu, utilizarea fosforului radioactiv și a autoradiografiei au făcut posibilă detectarea prezenței metabolismului intensiv în osul în creștere; utilizarea iodului radioactiv și a autoradiografiei au făcut posibilă clarificarea tiparelor de activitate ale glandei tiroide; introducerea compușilor marcați - precursori ai proteinelor și acizilor nucleici și autoradiografia au contribuit la clarificarea rolului anumitor structuri celulare în schimbul acestor compuși vitali. Metoda autoradiografiei face posibilă determinarea nu numai a localizării radioizotopului într-un obiect biologic, ci și a cantității acestuia, deoarece numărul de boabe de argint reduse ale emulsiei este proporțional cu numărul de particule care acționează asupra acestuia. Analiza cantitativa macroautografele sunt efectuate folosind tehnici fotometrice convenționale, iar microautografele sunt efectuate prin numărarea granulelor de argint sau a urmelor formate în emulsie sub influența particulelor ionizante la microscop. Autoradiografia începe să fie combinată cu succes cu microscopia electronică

autoradiografie, autoradiografie, radioautografie, o metodă de studiere a distribuției substanțelor radioactive în obiectul studiat prin aplicarea unei fotoemulsii sensibile la radiațiile radioactive asupra obiectului. Substanțele radioactive conținute în obiect par să se fotografieze singure (de unde și numele). Metoda A. este utilizată pe scară largă în fizică și tehnologie, în biologie și medicină – oriunde se folosesc indicatori izotopi.

Dupa dezvoltarea si fixarea emulsiei fotografice pe aceasta se obtine o imagine care afiseaza distributia studiata. Există mai multe moduri de a aplica emulsie fotografică pe un obiect. Placa fotografică poate fi aplicată direct pe suprafața lustruită a probei sau poate fi aplicată o emulsie lichidă caldă pe eșantion, care, atunci când se solidifică, formează un strat strâns adiacent probei și este examinată după expunere și fotoprocesare. Distribuția substanțelor radioactive este studiată prin compararea densității de înnegrire a filmului fotografic din probele de testare și de referință (așa-numita macroradiografie). A doua metodă constă în numărarea urmelor formate de particulele ionizante într-o emulsie fotografică cu ajutorul unui microscop optic sau electronic (microradiografie). Această metodă este mult mai sensibilă decât prima. Pentru obținerea macroautografelor se folosesc folii transparente și emulsii de raze X, iar pentru microautografe se folosesc emulsii speciale cu granulație fină.

O imagine fotografică a distribuției substanțelor radioactive în obiectul studiat, obținută prin metoda A., se numește autoradiogramă, sau autoradiograf.

Pe orez. 12 Și 3 sunt date exemple de autoradiograme. Metoda A. poate fi utilizată pentru a detecta prezența elementelor radioactive în diverse minereuri, distribuția elementelor radioactive naturale în țesuturile organismelor vegetale și animale etc.

Introducerea compușilor marcați cu radioizotopi în organism și studiul suplimentar al țesuturilor și celulelor folosind metoda A. permite obținerea de date precise despre celulele sau structurile celulare specifice care au loc anumite procese, localizarea anumitor substanțe și stabilirea parametrilor de timp. a unui număr de procese. De exemplu, utilizarea fosforului radioactiv și A. a făcut posibilă detectarea prezenței metabolismului intensiv în osul în creștere; utilizarea iodului radioactiv și A. a făcut posibilă clarificarea tiparelor de activitate ale glandei tiroide; introducerea compușilor marcați – precursori ai proteinelor și acizilor nucleici, iar A. a contribuit la clarificarea rolului anumitor structuri celulare în schimbul acestor compuși vitali. Metoda A. face posibilă determinarea nu numai a localizării unui radioizotop într-un obiect biologic, ci și a cantității acestuia, deoarece numărul de boabe de argint reduse ale unei emulsii este proporțional cu numărul de particule care acționează asupra acesteia. Analiza cantitativă a macroautografelor este efectuată folosind tehnici convenționale. fotometrie,și microautografe - prin numărarea grăunților de argint sau a urmelor la microscop care au apărut în emulsie sub influența particulelor ionizante. A. începe să fie combinat cu succes cu microscopia electronică. Vezi si Radiografie.

Lit.: Boyd D. A. Autoradiografia în biologie și medicină, trad. din engleză, M., 1957; Zhinkin L.N., Aplicarea izotopilor radioactivi în histologie, în cartea: Indicatori radioactivi în histologie, L., 1959, p. 5-33; Perry R., Autoradiografie cantitativă, Methods in Cell Physiology, 1964, v. eu, cap. 15, p. 305-26.

N. G. Hrușciov.

Orez. 2. Autoradiogramă (amprentă) care arată distribuția fosforului (32 P) în frunzele de roșii. Planta a fost plasată mai întâi într-o soluție care conținea fosfor radioactiv. Zonele luminoase corespund unor concentrații crescute ale izotopului radioactiv; se poate observa că fosforul este concentrat în apropierea tulpinii și în părțile vasculare ale frunzelor.


Orez. 1. Microradiograma unei probe de nichel. Se studiază difuzia staniului marcat cu izotopul radioactiv 113 Sn în nichel. Distribuția staniului radioactiv arată că difuzia are loc în principal de-a lungul limitelor granulelor de nichel.


Orez. 3. Includerea timidinei marcate cu tritiu în nucleele celulelor țesutului conjunctiv, care este utilizată pentru construcția acizilor nucleici. Mărit de 600 de ori.